introduction
Les régulateurs de croissance des plantes synthétisés par les plantes sont nécessaires à leur croissance et à leur développement. Mais, induire la même réponse à l'intérieur d'un laboratoire dans des conditions artificielles, il nécessite l'ajout de régulateurs de croissance des plantes exogènes au milieu.
Aujourd'hui, plusieurs régulateurs de croissance des plantes (RPG) naturels et synthétiques, hormones végétales, ou des phytohormones sont disponibles pour une utilisation dans des expériences de culture tissulaire. Mais comment préparer une solution de PGR est un problème ou une confusion des plus courants auxquels nos cultivateurs sont confrontés !
Donc, dans cet article, nous avons expliqué comment préparer la solution mère de régulateurs de croissance des plantes et la solution mère de NaOH (solvant) nécessaires pour dissoudre l'hormone sous forme de poudre.
Comment préparer une solution stock de PGR ?
Pour préparer la solution mère de tout régulateur de croissance des plantes, suivez les étapes ci-dessous :
- Prélevez 50 ml de tube Falcon pour chaque hormone pour laquelle vous souhaitez préparer le bouillon.
- Étiquetez chaque tube correctement avec le nom de l'hormone.
- Pour préparer 1 mg/L de solution de travail d'hormone de croissance végétale, préparer 1g/L de solution avec de l'eau.
- Dans la vidéo, nous mesurons 0,05 gramme (50 mg) de forme en poudre de l'hormone pour préparer une solution mère de 50 ml.
- Vous pouvez utiliser une tasse et une spatule pour mesurer chaque régulateur de croissance des plantes. Mais, vous devez changer la tasse et nettoyer ou changer la spatule chaque fois que vous mesurez un autre régulateur de croissance des plantes pour éviter toute contamination croisée de vos solutions mères.
Remarque :À partir d'un flacon de 100 grammes de régulateurs de croissance des plantes PCT, vous pouvez préparer 100 litres de solution mère. Cependant, vous n'avez besoin que de 1 ml de solution mère pour faire 1 litre de milieu. Donc, dans l'ensemble, vous pouvez préparer 100 000 litres de média par bouteille.
- L'étape suivante consiste à dissoudre la forme en poudre du régulateur de croissance. Il ne se dissoudra pas directement dans l'eau, donc vous avez besoin d'un solvant.
- Utilisez NaOH comme solvant pour dissoudre la forme en poudre du régulateur de croissance.
- À l'aide d'une micropipette, mesurer 1 ml de NaOH et l'ajouter au tube Falcon de 50 ml contenant le régulateur de croissance en poudre. Mélangez-le correctement et changez les pointes de pipette avant de passer au mélange des prochains régulateurs de croissance pour éviter toute contamination croisée entre les hormones (si vous préparez une solution mère d'hormones végétales de plus d'une hormone).
Vous pouvez également utiliser le petit agitateur ou secouer le tube ou le flacon pour dissoudre l'hormone en poudre dans le solvant.
Remarque :La procédure pour préparer 1M NaOH est donnée ci-dessous. Donc, prendre 1 ml de NaOH de la solution 1M préparée pour dissoudre les régulateurs de croissance des plantes.
- Ajoutez ensuite 49 ml (car vous avez déjà ajouté 1 ml de NaOH pour dissoudre l'hormone en poudre) d'eau distillée à l'aide d'une pipette pour faire 50 ml de la solution mère de l'hormone.
- Puis, il est temps de stériliser la solution mère car ils ne sont pas stériles. Vous devez savoir si votre hormone est résistante à la chaleur ou non.
- Si l'hormone n'est pas résistante à la chaleur, alors, vous devez filtrer la solution à la seringue une fois que le milieu a refroidi à au moins 60 degrés Celsius et s'il résiste à la chaleur, vous pouvez autoclaver la solution.
- Ensuite, votre solution mère est prête à être utilisée pour votre expérience. Vous pouvez le diluer pour l'amener à la concentration souhaitée.
Comment préparer une solution de NaOH 1M ?
L'hydroxyde de sodium (NaOH) est utilisé pour augmenter le pH des milieux de culture ou dissoudre la forme en poudre de régulateur de croissance.
- Pour préparer la solution mère de NaOH, vous avez besoin de pastilles de NaOH, une spatule, Erlenmeyer.
- Ajouter 100 ml d'eau distillée dans l'erlenmeyer à l'aide de la pipette.
- Pour faire une solution molaire de NaOH, vous avez besoin de la formule :
Molarité =non. de moles de soluté / 1 litre
Et, une mole d'hydroxyde de sodium =40 grammes
Donc, si vous voulez préparer 1M de solution de NaOH, vous avez besoin de 40 grammes de NaOH dissous dans 1L de solution.
Mais, ici nous ne préparons que 100 ml de la solution mère, donc pour ça, vous n'avez besoin que de 4 grammes de NaOH dissous dans 100 ml d'eau.
- Mesurer 4 grammes de NaOH à l'aide d'une spatule sur une balance.
- Ajouter les pastilles de NaOH mesurées dans l'eau et à l'aide d'un agitateur en faire une solution homogène.
- Une fois les pastilles dissoutes, transférer la solution dans le flacon de stockage.
- Votre solution de NaOH 1 molaire est prête à l'emploi pour vos expériences.
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