Vous n'avez pas besoin de plaques de gélose pour faire pousser des champignons, et de nombreux producteurs de champignons achètent du blanc de grain ou des blocs de fruits colonisés et se concentrent sur la phase de fructification de la culture des champignons.
Mais si vous êtes un passionné de champignons et que vous souhaitez expérimenter l'intégralité du processus de culture ou cloner vos souches de champignons préférées, apprendre à travailler avec des plaques de gélose est bénéfique.
Poursuivez votre lecture pour en savoir plus sur la gélose, les avantages des plaques de gélose, les différents types de milieux de gélose et comment fabriquer des plaques de gélose étape par étape.
Qu'est-ce que l'Agar ?
L'agar est une substance gélatineuse transparente, inodore et insipide dérivée d'algues rouges.
Il est utilisé comme agent gélifiant, épaississant et stabilisant dans les produits alimentaires et pour créer des substrats de culture nutritifs pour les spores de champignons et le mycélium.
La gélose est solide à température ambiante. Comme la gélatine, elle est utilisée comme solidifiant. Plus vous ajoutez d'agar à un mélange, plus le substrat de culture final est ferme.
Comment préparer la gélose pour champignons ?
Pour préparer de l'agar pour la culture des champignons, combinez-le avec une substance riche en nutriments et de l'eau, puis stérilisez le mélange obtenu dans un autocuiseur ou un autoclave.
Le mycélium se développera-t-il sur juste de la gélose ?
Le mycélium de champignon ne poussera pas sur de la gélose ordinaire car il contient peu ou pas de nutriments.
Les mycologues ajoutent de la gélose à un liquide riche en nutriments pour créer des plaques de gélose aux champignons stériles adaptées à la culture du mycélium.
Plusieurs recettes différentes sur plaques de gélose fournissent les nutriments nécessaires à la croissance mycélienne.
Nous les aborderons plus en détail ci-dessous.
Pourquoi utiliser les plaques de gélose ?
Les plaques de gélose sont des boîtes de Pétri contenant une solution de gélose stérile riche en nutriments qui fournit des nutriments permettant au mycélium de se développer dans l'environnement stérile à l'intérieur des boîtes de Pétri.
Ils vous permettent de cloner des champignons et de faire germer de nouvelles souches à partir d'empreintes de spores de champignons avec moins de risque de contamination.
La gélose est incolore, ce qui facilite la détection et l'élimination de toute contamination par des champignons.
Si vous remarquez une contamination se développer dans votre mycélium, découpez un morceau de mycélium sain, transférez-le dans une autre boîte de Pétri avec une solution de gélose stérile riche en nutriments et laissez-le continuer à croître.
Pensez à jeter la plaque de gélose contaminée.
Vous devrez peut-être transférer du mycélium sain plusieurs fois avant d'obtenir une boîte de Pétri de mycélium de champignon propre et sans contaminant, prête pour la prochaine étape de croissance.
Les plaques d'agar vous permettent également de conserver le mycélium de champignon pendant de longues périodes.
Une fois qu'une boîte de Pétri est entièrement colonisée, conservez-la dans un sac en plastique scellé au réfrigérateur et le mycélium peut rester viable jusqu'à 12 mois.
Types de milieux géloses
Bien qu'il existe de nombreuses recettes de gélose aux champignons, aucune n'est parfaitement adaptée à toutes les espèces de champignons, car différents champignons ont des besoins nutritionnels différents.
Essentiellement, ils sont tous fabriqués en ajoutant une source de nourriture à la gélose afin de créer un milieu de gélose riche en nutriments pour les cultures de champignons.
Lorsque vous commencez, il est préférable de ne pas utiliser de recettes compliquées avec de la gélose. Un milieu gélose à usage général vous permettra de faire germer des spores, d'isoler des souches de champignons et de cultiver du mycélium.
Voici quelques recettes d'agar populaires et faciles à préparer pour la culture des champignons :
Il s'agit d'une recette populaire de gélose aux champignons, largement utilisée par les cultivateurs de champignons qui apprécient sa polyvalence.
La gélose à l'extrait de malt (MEA) est fabriquée à partir d'orge maltée riche en nutriments, créant une plaque de gélose avec un mélange de nutriments similaire à la source alimentaire naturelle de nombreux champignons comestibles.
Il est très efficace pour cultiver des espèces de champignons saprotrophes qui se nourrissent de bois en décomposition et d'autres matières végétales dans la nature.
Comme la gélose à l'extrait de malt contient de nombreux nutriments, elle favorise une croissance mycélienne vigoureuse et est idéale pour cloner des champignons et créer des cultures de champignons.
Les ingrédients sont facilement disponibles et peuvent être trouvés dans la plupart des épiceries ou des magasins de fournitures pour brasseurs.
Ingrédients :
- 500 ml d'eau
- 10 g de poudre d'agar
- 10 g d'extrait de malt
Certains producteurs ajoutent 1 g de levure à cette recette pour apporter encore plus de nutriments.
Vous pouvez également ajouter du charbon actif pour fabriquer des plaques de gélose noire.
Gélose pomme de terre et dextrose (PDA)
La gélose au dextrose de pomme de terre (PDA) est un autre milieu de gélose couramment utilisé par les producteurs de champignons.
Dans cette recette, la fécule de pomme de terre et le dextrose fournissent les nutriments nécessaires à la survie d'un large éventail d'espèces de champignons.
La gélose au dextrose de pomme de terre est extrêmement polyvalente et particulièrement utile pour la germination des spores et le maintien des cultures mères.
Ingrédients :
- 500 ml d'eau
- 10 g de poudre d'agar
- 10 g de dextrose
- 2 g d'infusion de pomme de terre
Les producteurs ajoutent souvent de la levure à cette recette de base.
Gélose à l'avoine
La gélose à l'avoine est un type économique de milieu de gélose utilisé pour la culture du mycélium. Il se compose de flocons d'avoine ordinaires et d'agar-agar et est idéal pour les débutants.
Pour préparer de la gélose à l'avoine, faites tremper 40 g de flocons d'avoine dans 500 ml d'eau bouillante pendant 10 minutes, en remuant de temps en temps, puis filtrez le mélange pour éliminer les grosses particules de flocons d'avoine avant d'ajouter la gélose.
Ingrédients :
- 500 ml d'eau
- 40 g de flocons d'avoine
- 10 g de poudre d'agar
Les producteurs ajoutent souvent de la levure à cette recette pour fournir plus de nutriments.
Comment préparer des plaques de gélose étape par étape
Cet article se concentre sur la fabrication de plaques de gélose à l'extrait de malt léger qui supportent la plupart des espèces de champignons comestibles.
Vous aurez besoin du même équipement pour réaliser d’autres recettes. La seule différence sera ce que vous utiliserez comme source de nutriments pour le mycélium du champignon.
Suivez les étapes ci-dessous pour préparer des plaques de gélose à l'aide de la recette de gélose à l'extrait de malt léger :
Étape 1 :Rassembler les fournitures
La première étape consiste à rassembler toutes les fournitures et équipements dont vous aurez besoin pour fabriquer des plaques de gélose, notamment :
- Agar agar – La gélose n'est pas toujours facile à trouver localement et vous devrez peut-être la commander en ligne.
- Extrait de malt léger – Vous trouverez de l'extrait de malt dans les brasseries locales ou en ligne.
- Levure nutritionnelle (facultatif) – Vous trouverez souvent de la levure nutritionnelle dans les épiceries diététiques et bio.
- Eau – Certains producteurs suggèrent d'utiliser de l'eau distillée, mais l'eau du robinet convient également.
- Boîtes de Pétri – Vous pouvez les commander en ligne auprès des sociétés de fournitures de laboratoire. Les boîtes de Pétri en plastique jetables fournies dans un emballage pré-scellé et stérilisé fonctionnent bien.
- Bouteille ou pot à large goulot avec un trou dans le couvercle – Les bocaux Mason fonctionnent bien et vous pouvez acheter des couvercles spéciaux ou percer vous-même un trou dans un couvercle standard.
- Rembourrage Polyfill à utiliser comme filtre dans le trou du couvercle du pot
- Feuille d'étain pour recouvrir les couvercles de vos bocaux lors de la stérilisation
- Balance numérique pour mesurer vos ingrédients secs
- Autocuiseur pour la stérilisation
- Poste de travail propre et boîte à air calme ou Hotte à flux laminaire pour aider à prévenir la contamination
Image de Spooky Mushrooms
Étape 2 :Mélanger les ingrédients
Des mesures précises sont cruciales lors de la fabrication de plaques de gélose, car des quantités incorrectes peuvent entraîner un ralentissement de la croissance du mycélium et augmenter les risques de contamination.
Utilisez votre balance numérique pour mesurer 10 g d'agar et 10 g d'extrait de malt léger, ainsi qu'un pichet doseur en verre pour mesurer l'eau chaude.
De nombreux producteurs utilisent de l'eau bouillante, mais l'eau chaude du robinet fera également l'affaire.
N'oubliez pas que l'agar ajouté à l'eau froide commencera à se solidifier immédiatement, ce qui rendra le mélange difficile.
Ajoutez les ingrédients secs à l'eau chaude de votre verre doseur et remuez vigoureusement jusqu'à ce que l'agar et l'extrait de malt soient dissous.
Étape 3 : Stériliser
Votre solution est prête à être stérilisée une fois que les ingrédients secs sont complètement dissous.
Versez la solution dans vos bocaux ou flacons en les remplissant aux deux tiers environ pour éviter qu'ils ne débordent pendant la stérilisation.
Fermez les bocaux avec vos couvercles modifiés qui ont des trous remplis de polyfill. Ces trous permettent un échange gazeux stérile pendant que le mélange de gélose refroidit après la stérilisation.
Ensuite, couvrez les couvercles avec du papier d'aluminium pour empêcher l'eau de pénétrer dans les bocaux pendant la stérilisation, et placez les bocaux ou les bouteilles à l'intérieur de votre autocuiseur.
Placez-les debout sur une grille afin qu'ils ne touchent pas la base de l'autocuiseur.
Vous voudrez également vous assurer qu’ils ne se touchent pas ou qu’ils ne touchent pas les côtés de l’autocuiseur.
En suivant les instructions de votre autocuiseur, stérilisez le mélange d'agar pendant 30 minutes à 15 PSI. N'oubliez pas de ne commencer le chronométrage qu'une fois que l'autocuiseur atteint 15 PSI.
Une fois le temps écoulé, éteignez la cocotte minute et laissez votre mélange d'agar refroidir à environ 115-125°F (46-52°C). Il est suffisamment frais pour être manipulé mais suffisamment chaud pour rester liquide à cette température.
Cela prend généralement quelques heures et vous ne pouvez pas précipiter le processus. Verser les assiettes alors que votre mélange est trop chaud peut déformer ou endommager les boîtes de Pétri en plastique.
Étape 4 :Verser la gélose
L’un des facteurs de réussite les plus importants à ce stade est de travailler dans un environnement propre et stérile pour aider à prévenir la contamination.
Idéalement, vous devriez travailler devant une hotte à flux laminaire, mais une boîte à air calme contribuera également à réduire la contamination.
Ouvrez la première boîte de Pétri et versez un peu de mélange d'agar, en ajoutant suffisamment pour couvrir le fond. Ensuite, fermez-le rapidement et passez au plat suivant.
Versez toutes vos boîtes de Pétri les unes après les autres en une seule séance sans toucher l'intérieur de la boîte avec vos mains. Essayez d'ouvrir le couvercle de chaque boîte de Pétri le moins de temps possible.
Laissez les boîtes de Petri empilées devant votre hotte à flux laminaire en fonctionnement ou à l'intérieur de la boîte à air calme jusqu'à ce qu'elles aient refroidi à température ambiante.
Étape 5 :Sceller les plaques de gélose
Vous devrez attendre environ 30 minutes à 1 heure pour que les plaques de gélose refroidissent et se solidifient.
Pendant le refroidissement, certaines assiettes peuvent présenter de la condensation à l'intérieur des couvercles. Cette condensation initiale se dissipera et ne pose généralement pas de problème.
Si vous ne prévoyez pas d’utiliser toutes les plaques de gélose immédiatement, vous devrez les sceller pour les conserver.
La plupart des producteurs conviennent que le parafilm de laboratoire est le meilleur matériau pour sceller les plaques de gélose, car le parafilm est respirant, flexible et empêche la contamination.
Coupez une longueur de parafilm d'environ 3 à 4 pouces (7 à 10 cm) de long, décollez le papier et, comme la plupart des parafilms mesurent 2 pouces (5 cm) de large, vous devrez le plier en deux dans le sens de la longueur.
Maintenant, enroulez le parafilm autour du bord de la boîte de Pétri, en l'étirant jusqu'à ce qu'il colle à la boîte.
Étape 6 :Conserver les plaques de gélose
Les plaques de gélose conservées correctement ont une durée de vie plus longue, mais pour de meilleurs résultats, utilisez-les dans un délai de deux à quatre semaines.
Le meilleur endroit pour conserver les plaques de gélose est dans un récipient scellé ou un sac en plastique au réfrigérateur entre 35 et 40 °F (2 à 4 °C).
Avant d'utiliser vos plaques, vérifiez-les soigneusement pour déceler tout signe de contamination, puis laissez-les se réchauffer à température ambiante avant de les ouvrir pour l'inoculation.
Cela permet d'éviter la condensation susceptible de provoquer une contamination.
Différentes façons d'utiliser les plaques de gélose
Les plaques de gélose sont exceptionnellement polyvalentes et les mycologues les utilisent de plusieurs manières, notamment :
- Pour faire pousser du mycélium à partir de spores – L'ajout de spores à la plaque de gélose riche en nutriments les encourage à germer et à former du mycélium.
- Pour multiplier une souche particulière de mycélium – Cela consiste à transférer un morceau de mycélium sain d'une plaque de gélose à une autre pour faire pousser plus de mycélium.
- Pour tester le frai des grains – Un échantillon de grain colonisé peut être transféré sur une plaque de gélose pour isolement ou test.
- Pour faire pousser du mycélium à partir d'une culture liquide – Vous pouvez inoculer une plaque de gélose avec une culture liquide pour la croissance mycélienne.
- Inoculer des substrats pour créer du frai – Cela implique de transférer un morceau de gélose colonisée sur du grain ou de la sciure de bois stérilisée pour commencer la ponte.
- Pour faire une culture de champignons liquide – Vous pouvez placer un morceau de gélose colonisée dans des solutions stériles riches en nutriments pour créer des cultures liquides.
- Pour stocker le mycélium – Pour un stockage à long terme, les producteurs peuvent transférer le mycélium sur gélose vers une culture inclinée.
Apprenez-en davantage sur la culture des champignons et comment commencer.
Réflexions finales
Les plaques d'agar vous permettent de cloner des champignons, de faire germer de nouvelles souches à partir d'empreintes de spores et de stocker le mycélium de champignon avec moins de risque de contamination.
Si vous aimez expérimenter et souhaitez expérimenter tout le processus de culture des champignons, les plaques de gélose vous faciliteront la vie.
Mais si vous êtes plus intéressé par la culture de champignons à des fins lucratives ou par la création d'une petite ferme de champignons, nous vous recommandons de sauter la partie agar et d'acheter du blanc de grain pour inoculer votre substrat de champignons en vrac.
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