introduction
Le charme foliaire, le motif de la panachure et de la texture des feuilles, et sa tolérance à la lumière du soleil limitée font des Alocasias l'une des plantes les plus populaires parmi les jardiniers paysagistes et les collectionneurs de plantes.
Alocasia comprend environ 100 espèces et est un genre morphologiquement diversifié de la famille des Arecaceae. Les membres sont largement utilisés à plusieurs fins. Ses feuilles, racines, et la tige sont utilisées à des fins comestibles à certains endroits, et la plante Giant Taro a de nombreuses propriétés médicinales dont antidiarrhéique, antifongique, et propriétés anti-inflammatoires.
Les propriétés médicinales et la beauté de la plante la rendent très recherchée par les gens. La demande vertigineuse pour ces plantes dans l'espace commercial a poussé les scientifiques à proposer une meilleure alternative pour répondre à la demande du marché. Et, les outils de culture tissulaire se sont avérés d'excellentes techniques pour remplir tous les objectifs susmentionnés.
Cet article présente une description de la Alocasia genres et ses membres et en outre, il vous mènera à la culture tissulaire de cette plante et à sa procédure.
À propos de l'usine
Alocasia est un genre avec des espèces de plantes à fleurs vivaces tubéreuses ayant de larges feuilles et rhizomes. Les plantes poussent généralement de 2 à 6 pieds de haut.
Les feuilles des plantes sont à long pétiole, en forme de pointe de flèche à en forme de cœur qui sont décorés et ornés de couleurs différentes dans différentes tailles, de 8" à 36" de long, selon les espèces. Les plantes sont communément appelées oreilles d'éléphant en raison de la ressemblance de leurs feuilles avec de grandes oreilles d'éléphant.
Ils sont originaires des forêts tropicales humides, sites de végétation secondaire, et le long des ruisseaux ou des endroits marécageux de l'Inde, Asie du sud est, et le sud de la Chine en passant par les îles du Pacifique Sud (en particulier les Philippines, Iles Carolines, et Indonésie) à l'est de l'Australie.
Alocasia a été le summum de la mode pour les jardiniers, les culturistes, et collectionneurs de plantes depuis plus de 150 ans. Ces plantes sont collectées et vendues à grande échelle pour atteindre une échelle commerciale.
L'existence de plusieurs espèces du genre a été menacée en raison de la collecte continue et de la destruction de l'habitat. La pression de la protection de ces plantes peut être soulagée en utilisant des techniques de micropropagation in vitro.
Culture de tissus de Alocasia
La culture tissulaire a été un outil biotechnologique essentiel dans les laboratoires de plantes en raison de son grand potentiel pour la propagation de plantes médicinales de grande valeur, fabrication de produits naturels de haute qualité, et la production rapide et en masse de plantes.
C'est la meilleure alternative pour la production de métabolites végétaux importants en médecine, multiplication rapide des espèces menacées ou rares, production de plantes indemnes de maladie, et la transformation plante-génome.
De nombreuses entreprises ont utilisé la technique de la culture de l'extrémité des pousses pour produire un grand nombre de clones d'aroïdes indemnes de maladie depuis 1974 (Hartman).
Ici, une procédure de culture de tissus d'Alocasia longiloba utilisant des graines a été couverte, qui est tiré de l'étude d'Abdulhafiz, F., Mohammed, UNE., Kayat, F., Zakaria, S., Hamza, Z., Reddy Pamuru, R., Hamza Z., Réduan, M.F.H. (2020). Micropropagation d'Alocasia longiloba Miq et propriétés antioxydantes comparatives d'extraits éthanoliques de la plante cultivée en plein champ, Cals propagés in vitro et dérivés in vitro. Les plantes, 9(7), 816. doi:10.3390/plants9070816
Procédure
- Matériel végétal et préparation des semences :
- Récolter les fruits de A.longoliba et les laver sous l'eau courante suivi d'un rinçage à l'eau distillée stérile pour éliminer complètement la poussière. Puis, séparez soigneusement les graines à la main et séchez-les à température ambiante pendant deux semaines.
- Test de viabilité des semences :
- Imbibez quelques graines (100 ou plus) dans de l'eau distillée stérile pendant 18 h à 25 ± 2 °C pour ramollir le tégument et activer les systèmes enzymatiques.
- Immerger les graines dans une solution de tétrazolium à 1% (pH 7,0 ± 2) et incuber à 45 ° C pendant 6 h dans l'obscurité.
- A la fin de la période d'incubation, laver les graines avec de l'eau distillée stérile et observer au microscope le changement de couleur. Puis, calculer le pourcentage de viabilité en tant que nombre d'embryons colorés/nombre total. d'embryons multiplié par 100.
- Stérilisation de la surface des semences :
- Laver les graines séchées de A. longiloba sous l'eau courante du robinet pendant 30 min.
- Stériliser en surface les graines avec une concentration de 40% de Clorox (hypochlorite de sodium 5,25 %) avec quelques gouttes de tween-20.
- Agiter les graines sur un agitateur orbital à 80 tr/min pendant 20 min.
- Laver les graines stérilisées avec de l'eau distillée stérile pour éliminer une trace de Clorox, puis éponger à sec sur l'étude de filtre Whatman stérilisé (90 mm).
- Traitement de pré-germination :
Pour briser la dormance des graines et maximiser la germination des graines, suivre la procédure pour traiter les graines :
- Scarifier les graines avec de l'acide sulfurique à 30% (H2SO4) pendant 15 min puis rincées à l'eau distillée pendant 10 min pour éliminer la trace de solution acide.
- Surface les stériliser avec 40% Clorox pendant 20 min, puis laver avec de l'eau distillée stérile trois fois à chaque fois pendant 1 min.
- Culture des graines sur un milieu constitué de milieu MS, additionné de 30 g L−1 de saccharose, 2,78 g L−1 Gelrite sans régulateur de croissance des plantes.
- Ajuster le pH à 5,7 ± 0,2 avant d'ajouter de la gélose, puis autoclavé à 121 ° C à 103 kPa pendant 20 min.
- Incuber les cultures à 25 ± 2 °C avec une photopériode de 16 h fournie par des lampes fluorescentes blanches froides.
- Induction et multiplication des pousses in vitro :
- Utilisez les graines de quatre semaines cultivées in vitro à ce stade.
- Retirer le cotylédon, hypocotyle, et la racine soigneusement.
- Inoculer environ 2 à 3 cm de la pointe des pousses dans un milieu MS additionné de cytokinine 6-benzyl amino purine (BAP), à 3 mg L-1.
- Pour l'induction des callosités :
- Traiter les graines avec de l'acide sulfurique à 30 % pendant 15 min, suivi d'une stérilisation de surface avec du Clorox à 40 % pendant 20 min.
- Lavez ensuite les explants avec de l'eau distillée stérile pour éliminer la trace de Clorox.
- Inoculer les graines désinfectées de manière aseptique dans un bocal contenant environ 25 ml de milieu (milieu MS complété par 3 mg de L-1 IAA) pour l'induction de callosités.
- Incuber les cultures à 25 ± 2 °C sous une lumière fluorescente froide avec un cycle lumière/obscurité de 16/8 h.
- Pour l'enracinement in vitro :
- Cultivez les pousses isolées (2 à 3 cm) de plusieurs cultures de pousses dans des bocaux en verre contenant 20 ml de milieu MS additionné d'acide indole-3-acétique à 0,5 mg L-1, additionné de 30 g de saccharose L−1 et de 8 g de gélose L−1 sous 16/8 h de photopériode lumière/obscurité.
- Après 4 semaines, retirez soigneusement les plantules bien enracinées (8 à 9 cm de hauteur) des récipients de culture et lavez-les soigneusement à l'eau courante du robinet.
- Puis, rincer les racines à l'eau pour éliminer le milieu gélosé.
- Conserver les plantules en chambre de culture à une température de 25 ± 2 °C pendant 5 jours avant d'être transférées en serre.
- Au bout de cinq jours, plantez les plantules dans un petit pot en plastique de 20 × 15 cm contenant un milieu de sol avec une combinaison de terre végétale et de mousse de tourbe dans un rapport de 1:2.
Continuez à surveiller votre plante et enregistrez sa croissance et notez tout changement négatif pour prendre des mesures instantanées avant que vos cultures ne soient complètement gâtées.
Et, si ce protocole fonctionne pour vous, faites-le nous savoir à [email protected].
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